miRNA檢測

服務(wù)介紹：
熒光定量PCR是通過熒光染料(SYBR Green)或熒光標記的特異性的探針，對PCR產(chǎn)物進行標記跟蹤，實時在線監(jiān)控反應(yīng)過程，結(jié)合相應(yīng)的軟件可以對產(chǎn)物進行分析，計算待測樣品模板的初始濃度?？梢杂糜跈z測mRNA、lncRNA、circRNA、miRNA的基因表達水平。最終所得的PCR產(chǎn)物可以通過瓊脂糖凝膠電泳進一步驗證引物特異性。
實驗流程：

1.接收樣本
2.組織勻漿、細胞和血液樣本吹打裂解-RNA提取-RNA濃度測定—逆轉(zhuǎn)錄成cdna—熒光定量PCR-(PCR產(chǎn)物電泳)-數(shù)據(jù)分析 其中mRNA為普通逆轉(zhuǎn)錄，lncRNA可選采取普通和特異性逆轉(zhuǎn)錄，circRNA和miRNA采取特異性逆轉(zhuǎn)錄
3.交付結(jié)果：完整項目報告(擴增曲線、數(shù)據(jù)分析、引物信息、實驗報告)
實驗周期：

60個循環(huán)內(nèi)，7個工作日內(nèi)出結(jié)果
樣品要求：
1、組織：100mg(黃豆大小)，最少50mg(綠豆大小)，脂肪組織，結(jié)締組織，纖維化組織適當增加。
　　
2、細胞：1×10^6個細胞,貼壁細胞舒展，未變圓;
　　
3、全血：2mL，最少1mL新鮮血液EDTA抗凝管;
　　
4、血清：2mL，干冰運輸;
　　
5、植物：葉、果肉、種子等需100mg，最少50mg。
　　
6、RNA樣品：純度OD260/280，比值為1.8-2.0，濃度≥500ng/ul，體積≥20ul。
　　
7、cdna：cdna原液20uL。
樣本運輸：
可選擇以下任何一種方式寄送標本
　　
1.動植物組織樣本、細胞樣本、血清、RNA、cDNA以干冰運輸;
　　
2.細胞樣本也可直接寄送培養(yǎng)瓶(密封保證不污染、灌滿培養(yǎng)液不漏出)，常溫運輸;
　　
3.全血樣本是EDTA抗凝管4度運輸。