鍍銀染色

【產(chǎn)品信息】

鍍銀染色實驗步驟
1、?石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ10min-無水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸餾水洗。
2、?硝酸銀反應(yīng)：切片浸入20%硝酸銀加蓋于暗處反應(yīng)20min。
3、?蒸餾水洗（在此期間配制銀氨溶液）：染色第2步用過的20%硝酸銀，逐滴加入氫氧化銨，邊滴邊攪拌，直到開始形成的白色沉淀又消失，銀液變清即為銀氨溶液。
4、?銀氨液處理：切片浸入銀氨液作用15min在此期間配制稀氨水，銀氨液用于下步配制顯影工作液）。稀氨水配制：蒸餾水30ml加氫氧化銨3滴。
5、?稀氨水中浸泡：切片移入稀氨水中浸泡（在此期間配制顯影工作液）。顯影儲備液：甲醛液20ml+蒸餾水100ml+硝酸1滴+檸檬酸0.5g。顯影工作液：取第4步用過的銀氨液30ml，加入顯影儲備液3滴，混合均勻，即配即用不能保存。
6、?顯色：切片浸入顯影工作液中顯色，約3-7min，鏡下控制顯色，金黃色的背景，神經(jīng)纖維呈黑色時即取出。切片浸入第5步用過的稀氨水中浸泡1min。流水沖洗1min。
7、?去除未反應(yīng)的銀離子：5%硫代硫酸鈉處理2min（固定已反應(yīng)的銀鹽和除去未反應(yīng)的銀離子）。流水沖洗5min。
8、?脫水封片：將切片依次放入95%酒精I(xiàn) 5min -95%酒精I(xiàn)I 5min-無水乙醇Ⅰ5min -無水乙醇Ⅱ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min中脫水透明，將切片從二甲苯拿出來稍晾干，中性樹膠封片。
9、?顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。