革蘭氏染色

【產(chǎn)品信息】

• 實驗步驟

1、石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自來水洗。

2、革蘭氏染色：切片滴加革蘭氏染液A滴染10s-30s，水洗，甩干；滴加革蘭氏染液B1min，水洗，甩干；巴氏吸管吸取革蘭氏染液C從載玻片磨砂面一端沖洗組織進行分化，至切片流下的革蘭氏染液C呈無色即可，水洗，甩干；將切片浸革蘭氏染液D溶液1s水洗，鏡檢，烤箱烤干。

3、脫水：將烤干的切片快速入三缸無水乙醇快速脫水，依次1s、3s、5s。

4、透明封片：切片放入干凈的二甲苯5min透明，中性樹膠封片。

5、顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。

• 結果判讀：

革蘭氏陽性菌呈紫色，革蘭氏陰性菌呈紅色。

注意事項：

1、染色過程中的革蘭氏染液C分化是關鍵步驟，需注意分化程度。

2、盡量不要重復染色，分化液在脫去片子顏色的同時也改變了細胞壁的通透性，影響了最后結果的準確性。

3、冬季氣溫較低時，染色時間可適當延長。