實(shí)驗(yàn)服務(wù) 流式檢測 細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 流式-JC-1 實(shí)驗(yàn)服務(wù) 流式檢測 細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 價(jià)格￥80單位樣貨號HKF6018品牌浩克 QQ53383090 咨詢購買 產(chǎn)品介紹產(chǎn)品參數(shù)資料下載 服務(wù)介紹： 貨號名稱規(guī)格價(jià)格HKF6018流式-JC-1樣80 一、實(shí)驗(yàn)簡介 線粒體膜電位的下降是細(xì)胞凋亡早期的一個標(biāo)志性事件。JC-1是一種理想的用于檢測線粒體膜電位的熒光探針，可以檢測細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。其原理是，當(dāng)線粒體膜電位較高時，JC-1聚集在線粒體基質(zhì)中，形成聚合物，488nm激發(fā)時的最大發(fā)射波長為590nm，可以產(chǎn)生紅色熒光，在流式上表現(xiàn)為FL1和FL2雙陽性;當(dāng)線粒體膜電位較低時，JC-1不能聚集在線粒體基質(zhì)中，此時JC-1為單體，488nm激發(fā)時最大發(fā)射波長為527nm，可以產(chǎn)生綠色熒光，形成流式圖匯總所有細(xì)胞FL1為陽性。凋亡細(xì)胞則大多為FL1單陽性。不同熒光顏色的轉(zhuǎn)變反應(yīng)線粒體膜電位的變化，常用紅綠熒光的相對比例衡量線粒體去極化的比例。? 二、流式JC-1實(shí)驗(yàn)步驟 1、收集細(xì)胞：細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入離心管中，1000rpm離心5min收集細(xì)胞,棄上清。 2、PBS洗滌細(xì)胞：加入3ml 4℃預(yù)冷的PBS完全重懸細(xì)胞，1000rpm離心5min，棄上清。沉淀震蕩混勻。 3、細(xì)胞計(jì)數(shù)：移取10微升在血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀上進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),調(diào)整細(xì)胞為0.5-1×10^6/ml。 4、裝載探針：按照1:500用無血清培養(yǎng)基稀釋JC-1，使終濃度為10ug/mL。 5、孵育探針：37°C細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育20分鐘，每隔3-5分鐘顛倒混勻一下，使探針和細(xì)胞充分接觸，用無血清的培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞三次，以去除未進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的探針。 6、上機(jī)檢測：流式細(xì)胞儀使用激發(fā)波長Ex=488nm，發(fā)射波長FL1(Em=525±20nm);FL2(Em=585±20 nm)，用Flow Jo軟件分析結(jié)果。 無 暫無 說明文檔下載說明書.pdf 上一篇: 流式周期下一篇: 流式-ROS 推薦 組織石蠟包埋 2019年12月8日 1678 實(shí)驗(yàn)介紹: 新鮮組織經(jīng)過固定取... 查看全文 ELISA檢測 2024年9月10日 1443 服務(wù)介紹： 酶聯(lián)免疫(ELISA)，利用抗原與抗體的特異性反應(yīng)將待測物與酶連接，然后TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終... 查看全文 看切（特殊要求） 2024年9月4日 3128 暫無 查看全文 載體構(gòu)建 2019年12月8日 1536 服務(wù)內(nèi)容 載體構(gòu)建服務(wù)與蛋白表達(dá)服務(wù)相配套，服務(wù)內(nèi)容主要指將目的基因連接到大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)適用的表達(dá)質(zhì)粒，如常用pET系列，pGEX系... 查看全文
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